抗草甘膦转基因大豆CP4-epsps基因快速简便的LAMP检测方法

来源：未知发布时间：16-03-22 点击数：

摘要：针对抗草甘膦转基因大豆的外源基因Ｃｐ４－ｅｐｓｐｓ，建立了一种基于环介导等温扩增（ｌｏｏｐ－ｍｅｄｉａｔｅｄｉｓｏｔｈｅｒ－ｍａｌａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ＬＡＭＰ）技术的抗草甘膦转基因大豆的检测体系，其扩增产物既可利用常规琼脂糖凝胶电泳检测，还可通过ＳＹＢＲＧｒｅｅｎＩ染色进行快速检测。ＬＡＭＰ检测体系中ｄＮＴＰｓ浓度为０．８ｍｍｏｌ／Ｌ、Ｍｇ２＋浓度为３ｍｍｏｌ／Ｌ、反应时间为４５ｍｉｎ时扩增效果最佳，其检测灵敏度为５μ ｇ／Ｌ，比常规ＰＣＲ灵敏１００倍。田间实际检测结果表明，ＬＡＭＰ检测结果和ＰＣＲ检测结果完全一致，准确率为１００％。本研究所建立的抗草甘膦转基因大豆ＬＡＭＰ检测方法具有简便快速、特异性强、灵敏度高等特征，是一种能够用于抗草甘膦转基因大豆检测、田间基因漂移监测和环境安全研究的有力工具。

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